Centrifuga de congelare cu viteză mică de birou este utilizată în laborator pentru separarea primară și extracția macromoleculelor biologice, sedimente etc. Capul său pivotant este realizat în principal din aliaj de aluminiu, care este de tip plat și tip unghi. Tubul centrifugal este realizat din sticlă dură, plastic dur din polietilenă și tub din oțel inoxidabil. Centrifuga este echipată cu un motor de antrenare, un temporizator, un regulator (indicator de viteză) și un sistem de refrigerare (intervalul de temperatură reglabil este de - 20 ~ 40 ℃), care poate înlocui capetele rotative cu capacități diferite și diferite tipuri de viteze de rotație, în funcție de la nevoile materialului centrifugal.

Etape detaliate de centrifugare pentru extracția proteinelor citoplasmatice și nucleare cu o centrifugă de congelare de birou cu viteză mică:

1. Determinați starea de creștere a celulelor. Starea de creștere a celulelor ar trebui să fie de 80% sau mai bună:

2. Se centrifugă la 1500r/min timp de 5 min

3. Aruncați supernatantul, spălați celulele cu volum egal de PBS rece și repetați de 3 ori ca în pasul 2

4. În funcție de cantitatea estimată de precipitare, adăugați de 5 ori volumul de tampon izotonic în particulele celulare pentru a face celulele să se suspende ușor și pentru a evita spuma pe cât posibil

5. Adăugați tampon de liză în celulele suspendate și puneți-l pe gheață timp de 15 minute pentru a lăsa celulele să se extindă, ceea ce poate fi verificat la microscop

6. Pentru celulele expandate din experimentul cu celule, adăugați 10% IGEPALCA-630 pentru ca concentrația finală să ajungă la 0,3%, amestecați bine și adăugați ușor

7. Centrifugați imediat (utilizați tub de 1,5 ml EP la 5500r/min timp de 30 de secunde pentru cantități mari; utilizați tub de 50 ml la 5500r/min timp de 2 minute pentru cantități mari)

8. Transferați supernatantul (proteina citoplasmatică) într-un nou tub de congelare

9. Suspendați celulele cu un volum de 5 ori mai mare de particule în suspensie în tampon izotonic și amestecați bine

10. Centrifugați suspensia celulară la 1500r/min timp de 5 minute și îndepărtați supernatantul

11. Suspendați particulele cu de 2/3 ori volumul tamponului de extracție

12. Așezați tubul pe mixerul vibrant, agitați și amestecați la 700r/min timp de 15min, apoi la 1400r/min timp de 15min. Întregul proces ar trebui să fie atent pentru a evita spuma

13. Centrifugați la 9400r/min timp de 15 minute, transferați supernatantul într-un tub de centrifugă nou congelat după centrifugare la temperatură joasă

14. Împărțiți-le în mai multe părți și congelați-le cu azot lichid și depozitați-le (depozitarea pe termen lung ar trebui să fie la - 80 ℃, depozitarea pe termen scurt ar trebui să fie la - 20 ℃)