În general, datorită compoziției complexe a sângelui, multe substanțe, în special plasma sau serul animalelor superioare, au un puternic efect de interferență asupra reacției dintre reactivul TAL (LAL) și endotoxină. Prin urmare, atunci când testăm endotoxina unor astfel de probe, trebuie să îndepărtăm substanțele interferente înainte de testare.

În prezent, substanțele de interferență din plasmă includ în principal diverși inhibitori de protează, proteine ​​de legare a endotoxinelor și inhibitori de plasminogen. Pentru colorimetrie, factorul Xa poate descompune lanțul peptidic Boc-LEU-Gly-Arg-PNA. Prin urmare, este necesar să se elimine aceste substanțe interferente înainte de determinare.

Metodele de pretratare pentru îndepărtarea substanțelor interferente din sânge sunt următoarele:

(1) Metoda de încălzire prin diluare: plasma este diluată de 3 ~ 10 ori cu apă dizolvată și apoi încălzită în apă la 37 ~ 100 ℃. Timpul de menținere este în general 5~10 minute;

(2) Metoda de extracție cu cloroform: adăugați aceeași cantitate de cloroform în plasmă și vibrăm timp de 3 ore, apoi luați stratul superior pentru detectare;

(3) Metoda de tratare cu eter: adăugați eter în plasmă pentru tratament și îndepărtați eterul la 40 ℃;

(4) Metoda acidului trifluoracetic: adăugați acid acetic într-o plasmă pentru a ajusta pH-ul 4,0 și apoi utilizați K2HPO4 pentru a ajusta pH-ul la 7~7,5;

(5) Metoda de tratare a agentului activ de suprafață: la fel ca metoda de încălzire prin diluare, numai apa de diluare este schimbată în surfactant;

(6) filtrare cu gel;

(7) Metoda de tratament alcalin: plasma a fost menținută la 0,2NNaOH 37 ℃ timp de 10 minute și apoi neutralizată cu HCI;

(8) Metoda acidului percloric (PCA) sau metoda nouă a acidului percloric (New PCA);

(9) Metoda margelelor: introduceți endotoxina specială care absorb rășina în plasmă, scoateți-o și adăugați reactiv LAL pentru reacție.

Printre aceste metode, metodele utilizate în mod obișnuit sunt metoda de extracție cu cloroform, metoda de încălzire prin diluție, metoda acidului percloric (PCA) și metoda acidului percloric nou (New PCA). Primele două metode trebuie discutate în timpul determinării din cauza existenței ratei de recuperare a endotoxinelor, a rezultatelor false pozitive și a altor probleme. Metoda PCA (New PCA method), datorită ratei bune de recuperare a endotoxinei adăugate, este utilizată în prezent în principal în tratamentul preclinic în Japonia.