1. Când determinați endotoxina în sânge, acordați atenție selecției metodelor și reactivilor.

2. Prepararea plasmei sau a serului

Ca probă clinică comună, plasma este proba principală, iar rata de utilizare a acesteia este mai mare de 95%. Prin urmare, este foarte important să se pregătească plasmă ca parte principală a fluidului corporal. Potrivit lui Das, endotoxina este în general atașată de trombocite în plus față de starea sa liberă, așa că este mai potrivit să se folosească ca probă plasmă care conține un număr mare de trombocite. Când se prepară plasmă umană sau plasmă animală, în prezent, pentru a preveni deteriorarea celulelor, țările străine folosesc în mare parte separarea la temperatură joasă, folosind probe de plasmă care conțin un număr mare de trombocite, adică la 4 ℃ 1000gx10 minute condiții de separare sau 3000gx40 condiții de separare de secunde când nu există o centrifugă la temperatură scăzută. Nu este permisă efectuarea separării de mare viteză și pe termen lung la temperaturi normale. În plus, la separarea plasmei sau a serului, trebuie evitată contaminarea bacteriană.

Prepararea serului: utilizați o seringă fără anticoagulant pentru a colecta sângele și a-l transfera într-un tub de centrifugă și puneți-l într-o baie de apă cu gheață timp de 30 de minute, la 4 ℃, 1000xg, 10 minute pentru centrifugare.

După separarea plasmei sau a serului, dacă nu este utilizat temporar, acesta poate fi congelat la - 80 ℃ și utilizat în decurs de 1 lună. Notă Pentru a evita adsorbția endotoxinei, vă rugăm să utilizați o eprubetă de sticlă pentru depozitare.

3. Tipuri și efecte ale anticoagulantelor

În timpul preparării plasmei, datorită adăugării anumitor anticoagulante, tipul și cantitatea de anticoagulante au un impact mare asupra ratei de recuperare. În general, anticoagulantele utilizate în mod obișnuit includ în principal heparina, citratul de sodiu și EDTA, dintre care heparina este cea mai utilizată. Cu toate acestea, știm că o cantitate mare de heparină va interfera cu reacția endotoxinei, în special pentru metoda de încălzire prin diluare și metoda de extracție cu cloroform, care va reduce rata de recuperare, dar va avea un impact mai mic asupra metodei PCA, deci cantitatea de heparină adăugată. și eliberat în timpul preparării plasmei necesită doar 2~5 μ L/ml este suficient.